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Ver el documento (formato PDF)   Muñoz, Enzo Ruben.  "Estudio de daño genético inducido en esperma de Drosophila melanogaster : análisis de letales recesivos ligados al sexo inducidos por neutrones de 3 MEV."  (1992)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
En esperma de Drosophila melanogaster la frecuencia de mutaciones letales recesivas ligadas al sexo inducida por neutrones o por rayos X crece linealmente, lo que significa que cada letal es el resultado de un impacto. A pesar de ésto hay evidencias conflictivas según las cuales a igualdad de dosis los neutrones serían menos eficientes o más eficientes que los rayos x en la inducción de este tipo de daño. Es decir que se encontraron Eficiencias Biológicas Relativas (RBE) (dosis de rayos x/dosis de neutrones, para una determinada cantidad de daño) menores y mayores de 1. Para explicar la menor eficiencia de los neutrones, se han propuesto dos hipótesis: 1) Como la fina traza de ionizaciones que se origina cuando se usan radiaciones de baja Transferencia Lineal de Energía (LET) como los rayos X, es suficiente para inducir un letal, parte de las ionizaciones presentes en las gruesas trazas de ionizaciones originadas durante la irradiación con neutrones (alto LET), resultarían superfluas. De esta forma, a igual cantidad total de ionizaciones producidas por ambos tipos de radiación, los neutrones aparecerían como menos eficientes. 2) Las gruesas trazas de ionizaciones producidas por los neutrones inducirían mutaciones letales muy próximas unas de otra, que serían contabilizadas comouna sola debido al método de detección y de allí su aparente menor eficiencia. Para explicar la mayor eficiencia de los neutrones, se ha sugerido que la mayoría de las mutaciones letales recesivas se deberían a daño en dos segmentos cromosómicos, que por plegamientos del cromosoma quedarían muy próximos. La mayor eficiencia de los neutrones para producir rupturas en los dos segmentos cromosómicos adyacentes, daría como resultado una mayor frecuencia de letales respecto de los rayos X. El desconocimiento de la real naturaleza de las lesiones inducidas por neutrones que son detectadas como letales recesivos en Drosophila, deja las hipótesis mencionadas en un plano puramente especulativo. Atento a ello y a fin de caracterizar el daño, en este trabajo se encaró el análisis, mediante pruebas de alelismo, de letales recesivos inducidos por neutrones. En una primera etapa se seleccionaron mutaciones letales recesivas en el cromosoma X inducidas por 3 MeV de neutrones. La frecuencia obtenida con una dosis media de 21,7 Gy fué de 7,9% en 13.679 cromosomas probados. Se calculó que para obtener la misma frecuencia de letales se hubieran requerido 34,34 Gy de rayos X, lo que indica que los neutrones resultaron más eficientes que los rayos X. El valor del RBE fué de 1,58 que está en línea con lo encontrado por otros autores en las mismas condiciones de experimentación. El análisis de los letales se circunscribió a aquellos localizados en un segmento del cromosoma X, comprendido entre las Secciones 18 F4-5 y 20 F4 y que corresponde a las 53 bandas más proximales del cromosoma polité­ nico. Para su selección se usó una duplicación del segmento a estudiar unida al cromosoma Y. La frecuencia de letales localizados íntegramente dentro del segmento fué de 5,5% del total de letales inducidos en el cromosoma X. Esta frecuencia está en relación al tamaño del segmento (53 bandas) y es similar a las encontradas con rayos x en regiones más alejadas del centrómero. Con los letales seleccionados se hicieron pruebas de complementación cruzándolos entre si y con duplicaciones, deficiencias y mutaciones visibles y letales de otros orígenes. Para la interpretación de estas pruebas se consideró que: a) dos letales no alélicos afectan unidades funcionales diferentes; b) dos letales alélicos comparten por lo menos una unidad funcional; c) un letal alélico a dos letales que no son alélicos entre si, afecta como mínimo a dos unidades funcionales que pueden ser adyacentes o no. El estudio permitió ubicar los letales en un mapa del segmento analizado que, con la adición de tres nuevas unidades de complementación identificadas en este trabajo (dos con efecto letal y una con efecto visible), consta de 33 unidades. Del mapa de complementación obtenido surgió que: i) sólo el 3,7% de los letales son dobles, es decir que consisten de dos mutaciones muy próximas una de otra, por lo que se descarta este tipo de lesión comocaracterístico del daño inducido por neutrones; ii) el 49%de los letales inducidos por neutrones afectan una unidad de complementación y el 51% dos o más, es decir que son deficiencias. Cuandose aplican los mismoscriterios seguidos en este trabajo a los datos existentes sobre letales inducidos por rayos X, surge que con este agente sólo el 21%de los letales se debe a deficiencias cromosómicas. De los resultados presentados puede concluirse que del total de daños producidos a una determinada dosis de radiación, los neutrones inducen una mayor proporción de deficiencias cromosómicas que los rayos x. Estas lesiones tienen prácticamente siempre efecto letal en Drosophila y seguramente son menos reparables por un sistema libre de error. Comoconsecuencia, en pruebas de inducción de mutaciones letales recesivas, se recupera una mayor frecuencia de letales cuando se usan neutrones y su RBE respecto de los rayos X es mayor de 1. Se postula que lo mismo debería observarse usando rayoso α u otras partículas pesadas de alto LET.

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Registro:
Título : Estudio de daño genético inducido en esperma de Drosophila melanogaster : análisis de letales recesivos ligados al sexo inducidos por neutrones de 3 MEV.    
Autor : Muñoz, Enzo Ruben
Director : Hunziker, Juan Héctor
Director Asistente : Poggio, Lidia
Año : 1992
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Comisión Nacional de Energía Atómica (CNEA)
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_2503_Munoz
Idioma : Español
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