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Ver el documento (formato PDF)   Costa, Cristina Susana.  "Control genético de la división y forma celular en bacterias"  (1995)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
En este trabajo se investigaron las funciones esenciales de los genes involucrados en el mantenimiento de la forma bacilar en Salmonella typhimurium a través del estudio de las alteraciones que provocan en el crecimiento bacteriano mutaciones que inactivan totalmente a dichos genes. Se aislaron inserciones del transposón Tn10∆16∆17 correspondientes a 3 de los 4 tipos de mutantes de forma conocidos: rodA, mre y divD. Las mutaciones rodA y mre no pudieron transducirse eficientemente a cepas salvajes, pero fueron toleradas por derivados resistentes al antibiótico β-lactámico mecilinam (Mec-R). y por mutantes cya o crp. Por otra parte, la única inserción divD obtenida pudo ser transducida con alta eficiencia a cualquier tipo de cepa. Estos resultados indican que los tres tipos de genes controlan la forma celular pero, además, rodA y mre llevan a cabo alguna función esencial en bacterias salvajes cuya falta es tolerada por cepas Mec-R, cya o crp. Se estudió uno de los mecanismos involucrados en la resistencia a mecilinam y tolerancia a mutaciones letales de forma mediante la caracterización de la cepa DA1138. Se determinó que esta cepa presenta una mutación condicional en el gen de la alanil-tARN sintetasa (alaS206) que es responsable de la resistencia a dicho antibiótico y tolerancia termosensibles. Ambas características dependen del efector de la respuesta estricta ppGpp, cuyo nivel se eleva al expresarse, a 41°C, la mutación alaS206. Se construyeron derivados de la cepa DA1138 portadores de las mutaciones rodA22::Tn10∆16∆17, mre-17::Tn10∆16∆17 y divD135::Tn10∆16∆17 para el estudio de su crecimiento en fase exponencial en condiciones de ausencia de tolerancia a mutaciones letales de forma (30°C). En dicha condición, los derivados rodA22 y mre-17 mostraron inhibición de la división celular y pérdida de la capacidad de formación de colonias a pesar de mantener las células sus signos vitales. Por el contrario, el derivado divD135 creció normalmente a 30°C. Los resultados obtenidos indican que la ausencia de los productos RodA y Mre (no así DivD)altera seriamente la división celular y la capacidad de formación de colonias en cepas salvajes durante la fase logarítmica. Dado el normal crecimiento de los tres derivados en condiciones de tolerancia (41°C), se concluye que las alteraciones ocasionadas por la falta de los productos RodA o Mre son compensadas por mutaciones que elevan el nivel del efector transcripcional ppGpp, probablemente a través de la inducción de algún mecanismo alternativo de división celular. Se demostró que la inhibición de la capacidad de formación de colonias del derivado rodA22 en condiciones de no-tolerancia puede revertirse en tres casos: a) con la llegada a la fase estacionaria, caracterizada por la inducción del gen rpoS, que codifica el factor σs, b) en fase logarítmica, en presencia de acetato o benzoato, posibles inductores del gen rpoS, y, c) en fase logarítmica, en ausencia del producto σs. Sin embargo, en ninguno de los tres casos se normaliza la división celular. No se observó resistencia a mecilinam ni tolerancia a mutaciones letales de forma en una cepa portadora de una mutación nula rpoS, lo que indica que la recuperación de la capacidad de formación de colonias es por sí sola insuficiente para conferir tolerancia y que este fenómeno requiere la restauración de la división celular. Los resultados obtenidos permitieron postular un modelo según el cual el regulador global σs actuaría controlando la capacidad de formación de colonias de mutantes letales de forma celular por medio de la transcripción diferencial de genes con funciones opuestas.

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Registro:
Título : Control genético de la división y forma celular en bacterias    
Autor : Costa, Cristina Susana
Director : Antón, Dora N.
Año : 1995
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Comisión Nacional de Energía Atómica (CNEA). Departamento de Radiobiología
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_2706_Costa
Idioma : Español
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