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Ver el documento (formato PDF)   Rovedatti, María Gabriela.  "Ecofisiología de anuros: aspectos del catabolismo del nitrógeno en condiciones fisiológicas y de estrés ambiental"  (1995)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
Se estudiaron aspectos del catabolismo de productos nitrogenados en anuros de diferentes especies, en distintos momentos de su ciclo de vida, en condiciones fisiológicas y de estrés ambiental. Se evaluaron los productos de excreción nitrogenada urinaria (amoníaco, urea y ácido úrico), la urea en plasma y la actividad específica de la arginasa y la uricasa. Se obtuvo el perfil de los productos de excreción nitrogenada urinaria de adultos Bufo arenarum, Leptodactylus ocellatus, Bufo granulosus, y Bufo chilensis de habitat terrestre, semiacuático, cavícola y montañoso respectivamente. La urea fue el componente mayoritario en la orina de todas las especies y se hallaron pequeñas cantidades de ácido úrico en las tres primeras. Se estudió el efecto de la dieta y el ayuno sobre el metabolismo de sustancias nitrogenadas para lo cual se dosó la actividad de la arginasa hepática, los productos de excreción nitrogenada urinaria y la urea en plasma en adultos de Bufo arenarum sometidos al consumo de diferentes cantidades de proteína. El ayuno redujo significativamente la actividad específica de la arginasa y aumentó el contenido total de proteínas hepáticas. La partición de los productos excretados resultó independiente de la ingesta de proteínas. Se realizó un seguimiento de la actividad de la arginasa en homogenatos totales de embriones a lo largo de 17 estadíos y el primer estadío larval de Bufo arenarum incubados en solución de Holtfreter diluída. La enzima fue detectada a partir del estadío de tubo neural y se observó un pequeño incremento en los estadios tempranos, el cual se tornó más pronunciado en la fase embrionaria final. La actividad se duplicó en el primer estadío larval coincidiendo con el momento en que los animales comienzan a alimentarse. La actividad de la arginasa hepática en larvas de Bufo arenarum de estadio 29 fue notablemente más alta que en el homogenato total de larvas de estadio 26; no obstante, la misma se mantuvo dos órdenes de magnitud por debajo de la actividad determinada en el hígado de adultos. Se evaluó la actividad de la arginasa embrionaria de Brgfoarenarum, en homogenatos totales en condiciones de estrés osmótico, desarrollando a los animales desde la fecundación en: agua destilada (simulando una sobrehidratación) y en solución de Holtfreter concentrada (simulando una ligera deshidratación) y se comparó con animales desarrollados en condiciones control (mantenidos en solución de Holtfreter). En los tres grupos la actividad creció a lo largo del tiempo. A partir del estadio de circulación branquial la actividad fue menor en el grupo de solución concentrada. En el último estadío embrionario, opérculo completo, la actividad específica de los tres grupos no presentó diferencias significativas. El estudio de la actividad de la uricasa hepática en homogenatos totales de embriones desde el estadío de opérculo completo, de larvas (estadio 29), juveniles (estadío 35) y adultos de Bufo arenarum indicó que la misma aumentó a medida que avanzó el desarrollo siendo significativa la diferencia entre el adulto y los estadios larvales. En hígado de larvas de estadío 29 mantenidas en solución de Holtfreter, agua destilada y solución de Holtfreter concentrada se encontró que la uricasa aumentó en la situación concentrada. Se comparó la actividad de la uricasa hepática de adultos de Bufo arenarum y Leptodactylus ocellatus siendo significativamente menor la de la segunda especie. Se evaluó la actividad de la arginasa en hígado de adultos de Bufo arenarum inyectados con cadmio, considerando a este metal como otro factor estresante ambiental. La misma disminuyó significativamente después de la inyección de cantidades subletales del metal. Se concluyó: l. El perfil de excreción nitrogenada no sería el mejor indicador de los ambientes que ocupan los anfibios adultos en cuanto a la disponibilidad de agua; la orina de los adultos de todas las especies estudiadas presentó cantidades medibles de ácido úrico. 2. La cantidad de proteínas ingerida por los anuros adultos modifica la actividad de la arginasa. 3. La actividad de la arginasa se detecta tempranamente en los embriones de Bufo arenarum y se incrementa a lo largo del desarrollo. 4. La arginasa embrionaria se ve reducida frente a un estrés osmótico al comienzo del desarrollo. 5. La uricasa aparece mas tardíamente en los embriones de Bufo arenarum que la arginasa y se incrementa a lo largo del desarrollo. 6. La actividad de la uricasa hepática en adultos podría ser considerada como un parámetro indicador del grado de terrestrialidad de los anuros ureotélicos. 7. En hígado de larvas la uricasa aumenta debido al estrés osmótico. 8. El cadmio inyectado a Bufo arenarum adultos provoca una reducción en la actividad de la arginasa hepática.

Abstract:
We studied aspects of nitrogen catabolism of different species of anurans, in varios stages of their life cycle, under physiological and stress conditions. Urinary nitrogen waste products (urea, ammonia and uric acid), plasma urea and the specific activity of arginase and uricase were evaluated; urine of adult of all studied species contained mensurable amounts of uric acid. The nitrogen waste product profile of Bufo arenarum, Leptodactylus ocellalus, Bufo granulosus, and Bufo chilensis of terrestrial, semi-aquatic, fossorial, and mountainous habitats respectively was obtained. Urea was the principal component in the urine of all the species, and small amounts of uric acid were found in the three first ones. The effect of diet and fasting on the nitrogen metabolism was studied. For this purpose, determinations of specific activity of hepatic arginase, urinary nitrogen excretion products and plasma urea were made in adult Bufo arenarum submitted to diets with different levels of protein. Fasting reduced arginase specific activity and increased total hepatic protein content. The distribution of excreted products proved to be independent of the ingested proteins. A screening of arginase activity in total homogenates of embryos was made along l7 stages and in the first larval stage of Bufo arenarum raised in Holtfreter solutions. The enzyme was detected from the stage of neural tube and a gradual increase in the early stages was observed, which became more pronounced at the end of embryonic development. The activity increased two fold at the beginning of larval stages when the animals start to feed. Hepatic arginase activity in Bufo arenarum tadpoles of stage 29 was remarkably higher than in total homogenates of stage 26 tadpoles; however, it remained two magnitude orders below the adult hepatic activity. Embryonic arginase activity of Bufo arenarum was evaluated in total homogenates in mild osmotic stress conditions, developing the animals from fertilization in: distilled water (simulating an overhydratation) and concentrated Holtfreter solutions (simulating slight dehydratation) and was compared with animals in control conditions (raised in Holtfreter solutions). In the three groups the activity increased with time. From the stage of gill circulation on the activity was lower in the group of concentrated solution. In the last embryonic stage, complete operculum, the specific activity of the three groups did not present significant differences. The study of hepatic uricase activity in total homogentes of embryos beginning at the stage of complete operculum, of tadpoles (stage 29), juveniles (stage 35) and adults of Bufo arenarum indicated that it was higher as the development advanced, the difference between the adults with respect to the other two stages being significant. In tadpoles of stage 29 liver mantained in Holtfreter solution, distilled water and concentrated Holtfreter solution it was found that uricase was increased in the concentrated situation. Hepatic uricase activity of adult Bufo arenarum and Leptodactylus ocellatus was compared, the one of the second species being significantly lower. Hepatic arginase activity of adult Bufo arenarum injected with cadmium was evaluated considering this metal as an anthropogenic environmental stressant. It decreased significantly after the injection of sublethal amounts of the metal. It was concluded that: 1. The nitrogen excretion profile would not be the best indicator of the environment of the adult amphibians in terms of water availability. 2. Arginase activity is modified by the amount of proteins taken by adult anuran. 3. Arginase activity is detected early in Bufo arenarum embryos and it increases along its development. 4. Osmotic stress reduced embryonic arginase activity at the beginning of the development. 5. Uricase appears later than arginase in Bufo arenarum embryos, and it increases along the development. 6. Adult hepatic uricase activity could be considered as an indicator parameter of the terretriality of ureotelic anurans. 7. Osmotic stress increased tadpole liver uricase activity. 8. Cadmium injected to adult Bufo arenarum provokes reduction in hepatic arginase activity.

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Registro:
Título : Ecofisiología de anuros: aspectos del catabolismo del nitrógeno en condiciones fisiológicas y de estrés ambiental    
Autor : Rovedatti, María Gabriela
Director : Salibián, Alfredo
Año : 1995
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Universidad Nacional de Luján. Departamento de Ciencias Básicas. Laboratorio del Programa de Ecofisiología Aplicada
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_2776_Rovedatti
Idioma : Español
Area Temática : 
Palabras claves : BUFO ARENARUM; LEPTODACTYLUS OCELLATUS; BUFO CHILENSIS; BUFO GRANULOSUS; METABOLISMO NITROGENADO; ANUROS ADULTOS; EMBRIONES; LARVAS; EXCRECIÓN NITROGENADA URINARIA; ONTOGÉNESIS; ARGINASA; URICASA; ESTRÉS OSMÓTICO; CADMIO SUBLETAL; BUFO ARENARUM; LEPTODACTYLUS OCELLATUS; BUFO CHILENSIS; BUFO GRANULOSUS; NITROGEN METABOLISM; ADULT ANURAN; EMBRYOS; LARVAE; URINARY NITROGEN EXCRETION; ONTOGENY; ARGINASE; URICASE; OSMOTIC STRESS; CADMIUM SUBLETHAL
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