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Ver el documento (formato PDF)   Menéndez, Ana Bernardina.  "Micoparasitismo de Trichoderma spp. sobre el patógeno vegetal de suelo Sclerotinia sclerotiorum : Pruebas preliminares sobre el biocontrol de esta enfermedad"  (1996)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
En este trabajo se estudió la capacidad de algunas especies de Trichoderma, en particular T. harzianum, como antagonistas del patógeno vegetal Sclerotinia sclerotiorum. En las pruebas de antagonismo "in vierto" se comprobé dicha capacidad en términos de la disminución del crecimiento de la colonia del patógeno y la reducción tanto de la viabilidad de los esclerocios como del desarrollo de otros nuevos. También se describió el proceso del micoparasitismo por parte del antagonista Trichoderma spp. sobre dos fases somóticas del patógeno: sus esclerocios y el micelio. En el primer caso se observó, con microscopía óptica, la colonización de los tejidos de los esclerocios infectados por parte del antagonista, comprobándose la total destrucción de la médula de los mismos. En el segundo, se observaron las interacciones hifales entre el micoparásito (T. harzianum BAFC cult. N§ 742) y el hospedante, tanto en cultivo dual como en un suelo estéril, con microscopía óptica y de barrido. En los cultivos duales, las hifas de T. harzianum crecieron hacia las de S. sclerotiorum enrollándose alrededor de ellas. En los últimos estadíos del proceso micoparasítico, se observaron enrollamientos o "coilings" muy densos y una degradación parcial de las paredes celulares de las hifas del patógeno. En suelo estéril, los conidios de T. harzianum germinaron y el micelio en desarrollo alcanzó al de S. sclerotiorum. Trichoderma formó ramificaciones cortas y cuerpos similares a apresorios los cuales podrían contribuir con la penetración de la pared del hospedante. Por otro lado se comprobé la capacidad del aislamiento de T. harzianum BAFC cult. N§ 742 para producir enzimas extracelulares que degradan las paredes celulares de S. sclerotiorum. Paralelamente se verificó la presencia de lectinas en una medio de cultivo líquido de S. sclerotiorum. En este trabajo se estudió además, la supervivencia de esclerocios de S. sclerotiorum en un suelo inoculado con T. harzianum en función de la concentración de inóculo del antagonista, de la temperatura y del pH. Posteriormente se llevaron a cabo pruebas preliminares sobre control biológico. Primero se desarrolló un sistema "in vierto" para evaluar la habilidad de Trichoderma para controlar la marchitez producida por S. sclerotiorum en plantas de pepino y lechuga: el recubrimiento de semillas con conidios de T. harzianum result¢ en reducciones del efecto de S. sclerotiorum sobre la emergencia y post-emergencia de las plantas de ambos hospedantes. Luego se realizó una búsqueda o "screening" en invernadero, con lechuga, en el cual se ensayaron varios aislamientos de Trichoderma spp. algunos de los cuales aumentaron los porcentajes de semillas germinadas y la supervivencia de las plantas, aunque no significativamente desde el punto de vista estadístico. Uno de estos aislamientos, T. harzianum BAFC cult. N§ 742, indujo además un incremento significativo en el peso seco del vástago de las plantas. Se realizaron dos ensayos independientes con lechuga en los cuales se empleó el aislamiento mencionado anteriormente como antagonista, obteniéndose, en uno de los ensayos, una reducción no significativa en la incidencia de la enfermedad. Sin embargo, se observaron aumentos en la mayoría de los parámetros de crecimiento de la planta medidos, todos estadísticamente significativos. Se efectuaron otros dos ensayos empleando plantas de soja como hospedante, uno en invernadero y el otro a campo. En ambos se verificó un control significativo de la enfermedad en los tratamientos con la aplicación de T. harzianum BAFC cult. N§ 742. En cambio, no se registraron diferencias significativas en el desarrollo de las plantas en ninguno de los dos casos. Se realizaron dos ensayos de biocontrol más, empleando girasol como hospedante, de los cuales se extrajeron resultados significativos referentes al aumento en el desarrollo de las plantas y la reducción de la incidencia de la enfermedad producida por S. sclerotiorum. Los resultados se discuten en forma independiente por capítulos y finalmente en forma global.

Abstract:
In this work, the ability of some species of Trichodema, particularly T. harzianum, as antagonists of the soilborne plant pathogen Sclerotinia sclerotiorum, was studied. Such hability was demonstrated in "in vierto" assays, in terms of the reduction of the pathogen colony, the sclerotia viability, as well as the development of new ones. The process of mycoparasitism by the antagonist Trichoderma spp. is also described on two somatic phases: the sclerotia and the mycelium. In the first case, the colonization of infected tissues of the sclerotia by the antagonists was observed with light microscopy, and verified the total destruction of the sclerotia medulla. In the second, hiphal interactions between the mycoparasite (T. harzianum BAFC cult. N§ 742) and its host, were observed in dual cultures and also in sterilized soil, with both light and scanning microscopy. In dual cultures, hyphae grew towards and coiled around the S. sclerotiorum hyphae. Dense coils and partial degradation of the Sclerotinia cell wall were observed in later stages of the parasitism. In sterile soil, T. harzianum conidia germinated and the developing mycelium made contact with that of S. sclerotiorum. Trichoderma formed short branches and appressorium-like bodies which propably aid in holding and penetrating the host cell wall. On the other hand, the capacity of the isolate BAFC N§ 742 of T. harzianum to produce enzimes degrading cell wall of mycelium and sclerotia of S. sclerotiorum, was demonstrated. Parallely, the presence of lectins in a liquid culture medium of S. sclerotiorum was also shown. In this work, the survival of sclerotia of S. sclerotiorum in soil inoculated with T. harzianum was studied, versus the concentration of the antagonist inoculum, the temperature and the pH. Later, preliminary assays on biological control were carried out "in vierto", in greenhouse and in the field. An "in vierto" system was developed to test the Trichoderma ability to control Sclerotinia wilt in cucumber and lettuce: coating seeds with T. harzianum conidia resulted in a reduction in the pre- and post-emergence effect of S. sclerotiorum in both hosts. Several isolates of Trichodema spp. were assayed in a greenhouse screening of antagonists, using lettuce plants as the host. Some isolates increased seeds germination and plants survival, although the differences were not significant at statistical level. One of these isolates, T. harzianum BAFC cult. N§ 742, also induced a significant increase of the aerial dry weight of plants. Two independent assays with lettuce were performed in which the above mencioned isolate was employed as antagonist. A reduction of the diseases incidence was obtained in one of the experiments but it was not significant. However, most of the growth parameters measured in the plants increased significantly. Another two experiments were carried out with soybean as the host, one in greenhouse and the other in the field. A significant control of the disease was verified when T. harzianum BAFC cult. N§ 742 was applied, in both experiments. In contrast, there were not significant differences regarding growth parameters of the plants in any of the two experiments. Sunflower plants were employed as hosts in two biocontrol assays, from which significant results, related to increase of plants development and disease control were obtained. Results are discused separatly in each chapter and globaly at the end.

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Registro:
Título : Micoparasitismo de Trichoderma spp. sobre el patógeno vegetal de suelo Sclerotinia sclerotiorum : Pruebas preliminares sobre el biocontrol de esta enfermedad     =    Mycoparasitism of Trichoderma spp. on the soilborne plant pathogen Sclerotinia sclerotiorum : Preliminary assays on biological control of this disease
Autor : Menéndez, Ana Bernardina
Director : Godeas, Alicia M.
Año : 1996
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_2823_Menendez
Idioma : Español
Area Temática : Biología / Micología
Biología / Patobiología
Palabras claves : TRICHODERMA; SCLEROTINIA SCLEROTIORUM; ANTAGONISMO; MICOPARASITISMO; ENZIMAS; VIABILIDAD DE ESCLEROCIOS; CONTROL BIOLOGICO; TRICHODERMA; SCLEROTINIA SCLEROTIORUM; ANTAGONISM; MYCOPARASITISM; ENZIMES; SCLEROTIA VIABILITY; BIOLOGICAL CONTROL
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