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Ver el documento (formato PDF)   Boschiroli, María Laura.  "Identificación, caracterización molecular y mutagénesis insercional de genes codificantes para antígenos proteicos de Brucella Abortus"  (1998)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
Brucella abortus, el agente etiológico de la brucelosis bovina, es una bacteria intracelular que replica en células fagocíticas y que también infecta a humanos, por lo que la enfermedad es considerada una zoonosis. Esta enfermedad produce grandes pérdidas en el sector pecuario y de salud pública del país y del mundo. Los factores de virulencia de esta bacteria son pobremente conocidos, y el diagnóstico de la enfermedad es aún dificultoso y poco confiable. Una manera de sobrellevar estas dificultades es por medio del estudio genético de la bacteria. En este trabajo se caracterizaron tres genes y las proteínas que éstos codifican de B.abortus S19, la cepa vacunal bovina. La estrategia para conocer el rol en la fisiología bacteriana fue por un lado obtener la de los genes y buscar homologías en bancos de datos, y por otro lado mutagenizartos por intercambio alélico y estudiar el comportamiento de las cepas mutantes in vivo e in vitro. Se lograron identificar genes del operón 2-oxoglutárico deshidrogenasa y la enzima superóxido dismutasa dependiente de cobre y zinc. En el primer caso, las mutantes muestran claras diferencias con respecto a la cepa salvaje, demostrando un rol fundamental de estas proteínas en la fisiología bacteriana. En el segundo caso, la cepa mutante no muestra diferencias significativas, confirmando resultados previos, por lo que se demuestra que esta proteína no es un factor de virulencia.

Abstract:
Brucella abortus, the causative agent of bovine brucellosis, is an intracellular bacteria which can replicate within phagocytic cells and can also infect humans, therefore the disease is considered a zoonosis. Brucellosis produces great economical and public health losses not only in our country but worldwide. Brucella’s virulence factors are poorly understood, and diagnosis is difficult and unreliable. A means to overcome this drawbacks is studying the bacterial genetics. In this work 3 genes from Brucella abortus vaccine Strain 19, and the proteins they codify for, were studied. In order to understand their physiological role, genes sequences were determined and compared to other known sequences in databases. On the other hand, these genes were knocked out by allelic replacement and mutant strains’ behavior was studied in vitro and in vivo. Genes from 2-oxoglutarate dehydrogenase operon and Cu/Zn superoxide dismutase were identified. Mutants for the former genes showed clear differences compared to the wild type strain, demonstrating an important physiological role in the bacteria. Confirming pre-existing results, mutants for the latter gene showed no significant differences, hence this protein is not a real virulence factor.

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Registro:
Título : Identificación, caracterización molecular y mutagénesis insercional de genes codificantes para antígenos proteicos de Brucella Abortus    
Autor : Boschiroli, María Laura
Director : Rossetti, Osvaldo Luis
Año : 1998
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA) Castelar. Centro de Investigaciones en Ciencias Veterinarias (CICV). Instituto de Biotecnología
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3019_Boschiroli
Idioma : Español
Area Temática : 
Palabras claves : BRUCELLA ABORTUS; BRUCELOSIS BOVINA; FACTORES DE VIRULENCIA; GENES; SECUENCIA NUCLEOTIDICA; CEPAS MUTANTES; 2-OXOGLUTARICO DESHIDROGENASA; SUPEROXIDO DISMUTASA CU/ZN; FISIOLOGIA BACTERIANA; BRUCELLA ABORTUS; BOVINE BRUCELLOSIS; VIRULENCE FACTORS; GENES; NUCLEOTIDE SEQUENCE; MUTANT STRAINS; 2-OXOGLUTARATE DESHYDROGENASE; CU/ZN SUPEROXIDE DISMUTASE; BACTERIAL PHYSIOLOGY
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