Tesis > Documento


Ver el documento (formato PDF)   Rossi, Eleonora Beatriz.  "Niveles plasmáticos e interacciones del sistema cofactor 2 de la heparina-trombina-dermatan sulfato"  (1999)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
URL:
     
Resumen:
El Cofactor II de la Heparina (HCII) es un inhibidor fisiológico del sistema de coagulación, miembro de la familia de serpinas. Inhibe específicamente trombina, una enzima clave del sistema hemostático. La capacidad del HCII de inhibir trombina es potenciada mas de 1000 veces por la presencia de glicosaminoglicano el Dermatán Sulfato (DS),. Aún no está claramente definido el papel que desempeña el HCII en la fisiología de la Hemostasia, postulándose su deficiencia corno leve factor de riesgo de trombosis. Los objetivos de este trabajo fueron: a) Identificar y caracterizar el HCII plasmático. b) Investigar in vitro la interacción HCII - trombina - Dermatán Sulfato, así como la posible acción de proteínas moduladoras de esta interacción. C) Estudiar la respuesta fisiopatológica de este inhibidor, ante estímulos de distinta magnitud de activación del sistema de coagulación. (Sépsis, injuria térmica, hemodiálisis, etc.). Los estudios electroforéticos (SDS-PAGE / Western Blot) del HCII revelaron que fisiológicamente un porcentaje de este inhibidor circula unido a una proteína plasmática, el fibrinógeno. La investigación in vitro de la interacción HCII-trombina-DS en concentraciones plasmáticas reveló que el HCII inhibe más eficazmente pequeñas (hasta 30 nM) que grandes concentraciones de trombina humana. La presencia de fibrinógeno en los ensayos in vitro, disminuye en un 45% la capacidad antitrombínica del HCII, sugiriendo la existencia de una interacción HCII-fibrinógeno observada en los estudios electroforéticos de plasmas. La modulación del fibrinógeno sería tiempo, concentración y temperatura dependientes. Lo cual concuerda con los estudios electroforéticos. La determinación de los valores de referencia de actividad y antigenicidad del HCII estableció un rango de : actividad 75 - 120% ; antigenicidad: 70 - 130%. El nivel de actividad de HCII de embarazadas con más de 30 semanas de gestación fue de 108 (88 - 160)%, presentando niveles de actividad de Dermatán Sulfato en circulación 1,15 (0 - 3,7) µg/ml. En pacientes quemados se determinó niveles de actividad de HCII ligeramente disminuídos 81 (75-95)%, que se mantuvieron durante los siete días estudiados. La actividad de DS fue 0,5 (0-1,3) µg/ml. Pacientes en hemodiálisis presentaron leve disminución en los niveles de actividad de HCII 83,0 (60 - 105) %, detectándose actividad de DS en circulación 0,31 (0 - 1,5) µg/ml. El descenso de la actividad de HCII en pacientes sépticos fue marcado 29 (15-120) %. Los niveles elevados de DS alcanzaron valores de hasta 3,4 µg/ml . La anticoagulación con dicumarínicos y heparina no fraccionada no modifican significativamente los niveles de HCII (91 ± 6,9 % y 94,8 ± 6,5 % respectivamente). Pacientes con hiperhomocisteinemia niveles de HCII dentro del rango de referencia 95 (60 - 115)% y niveles de actividad de Dermatán Sulfato 1.8 (0-2,9) µg/ml, que si bien son elevados no difieren significativamente del grupo control de edad.

Abstract:
Heparin Cofactor II (HCII) is a coagulation system inhibitor, member of the serpins family. Specifically it inhibits thrombin (Hemostatic System's central enzyme) and meizothrombin. The rate of inhibition of thrombin by HCII increases more than 1000-fold in the presence of dermatan sulfate (DS). Physiological HCII rol is still undefined, but its deficiency is a weak thrombosis risk factor. The aims of this thesis were : a) Plasmatic HCII characterization and identification. b) To investigate HCII-thrombin- DS in vitro interaction and the possible proteins modulation. C) To measure HCII plasmatic levels in argentine population and in different pathologies (burn, sepsis, haemodialysis, etc.). Electrophoresis studies (SDS-PAGE/Western Blot) showed that a HCII fraction circulates bound to a plasmatic protein, fibrinogen. HCII-thrombin-Ds interaction studies demonstrated that physiological HCII levels inhibit efficiently low human thrombin concentrations (until 30 nM). HCII antithrombin activity was diminished when fibrinogen was present, so that we suppose a HCII - thrombin interaction. Fibrinogen - HCII modulation would be time and concentration dependent. This observation agrees with plasmatic HCII electrophoretic studies. HCII activity and antigenic range, for Buenos Aires population was : 75-120% activity ; 70 - 130% antigenic. Pregnant women showed increased HCII activity levels: 108 (88-160) % and dermatan sulfate plasmatic activity: 1,15 (0-3,7) µg/ml. Burnt patients HCII levels were slightly diminished 81 (75-95)% and dermatan sulfate plasmatic activity found in these plasma patients was 0,5 (0-1,3) µg/ml. Similarly, low HCII plasmatic levels were observed in hemosyalized patients 83 (60-105) % and dermatan sulfate measured in plasma was 0,31 (0-1,5) µg/ml. Markedly decreased levels of HCII were found in septic patients, 29 (15-120)% and DS plasmatic concentration reached elevated values, 1,9 (0,004-3,4) µg/ml. No HCII activity modification was found in patients with hiperhomocysteinemia.

* A este resumen le pueden faltar caracteres especiales. Consulte la versión completa en el documento en formato PDF

Registro:
Título : Niveles plasmáticos e interacciones del sistema cofactor 2 de la heparina-trombina-dermatan sulfato    
Autor : Rossi, Eleonora Beatriz
Director : Kordich, Lucía
Año : 1999
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Hemostasia y Trombosis
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Químicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3079_Rossi
Idioma : Español
Area Temática : 
Palabras claves : COFACTOR II DE LA HEPARINA; TROMBINA; DERMATAN SULFATO; HEPARIN COFACTOR II; THROMBIN; DERMATAN SULFATE; FIBRINOGEN; HAEMOSTASIS
URL al Documento : 
URL al Registro : 
hola chau _gs.DocumentHeader_ chau2 _documentheader_ chau3
Estadísticas:
     http://digital.bl.fcen.uba.ar
Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Universidad de Buenos Aires
Intendente Güiraldes 2160 - Ciudad Universitaria - Pabellón II - C1428EGA - Tel. (54 11) 4789-9293 int 34