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Ver el documento (formato PDF)   Puebla, Andrea Fabiana.  "Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas"  (1999)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
Se ha estudiado la respuesta a estrés por bajas temperaturas y déficit hídrico en Gramíneas nativas de regiones con climas contrastantes de la Argentina. El modelo de trabajo se basó en el análisis comparativo del metabolismo de fructanos y sacarosa en relación con estreses abióticos en especies nativas de Patagonia y otras del mismo género adaptadas a regiones con climas más benignos. Bromus pictus y Bromus auleticus, se compararon como especies patagónicas y del centro y norte de Argentina, respectivamente. Se analizaron los azúcares que contienen fructosa en plantas control y tratadas. Se estudiaron los patrones de fructanos y se determinó la composición de oligosacáridos de ambas especies. Se estudiaron las enzimas del metabolismo de sacarosa y fructanos. Se midieron la actividad de las enzimas SPS, SS, INV y SST. La actividad SST mostró aumentos constantes frente al estrés por frío en la especie patagónica. Se desarrollo un nuevo método enzimático-colorimétrico para medir la actividad SST. Se estudiaron algunas propiedades bioquímicas de esta actividad parcialmente purificada de vástagos de B. pictus tratados a 4 °C. La actividad SST de Bromus pictus mostró un pH óptimo entre 5,5 y 6, no se saturó a altas concentraciones de sacarosa y mantuvo el 55% de la actividad a 30°C en incubaciones realizadas a 0°C. Se realizaron estudios de homología y expresión a partir de ácidos nucleicos de plantas de B. pictus tratadas con bajas temperaturas utilizando sondas heterólogas de la 6-SFT de cebada. Se demostró que en la especie patagónica hay secuencias homólogas de ADN y ARN a las existentes en cebada. Por la técnica de RT-PCR se clonó un fragmento de 760 pb del ADNc de Bromus pictus usando oligonucleótidos específicos en zonas altamente conservadas en otros genes de fructosil transferasas. La comparación de secuencias mostró una alta homología con la 6-SFT de cebada, con otras enzimas del metabolismo de fructanos de mono y dicotiledóneas y con INV ácidas de plantas.

Abstract:
Low temperature and water stress treatments were assayed in plants of various species of Gramineae, belonging to different regions of Argentina. The experimental model was based in comparative studies of fructan and sucrose metabolism in relation with the abiotic stresses in native plants from Patagonia and other species of the same generous adapted to northern regions of Argentina with mild climatic conditions. Bromus pictus and Bromus auleticus were compared as patagonic and northern species respectively. Fructose-containing sugars were analysed. The fructan pool was studied and oligosaccharide composition was determined. Sucrose and fructan enzymes were studied. SPS, SS, INV and SST were assayed in control and treated plants in both Bromus species. Increasing levels of SST activity were observed in patagonic plants exposed to low temperature. A novel enzymatic-colorimetric method to assay SST activity was developed. Some biochemical properties of SST activity partially purified from shoots of Bromus pictus treated with low temperatures, were studied. SST activity of Bromus pictus has pH optimum between 5,5-6, was non-saturated at high concentrations of sucrose and maintained high activity at 0°C. Southern and northern analysis were made with tissues of low temperature treated plants of Bromus pictus, using the ADNc of barley 6-SFT as a probe. Bromus sequences of DNA and RNA hybridised with the ADNc of barley. A ADNc fragment of Bromus pictus was cloned by RT-PCR using specific primers with high homology with plant fructosyltransferases. Sequence comparison has shown a high homology of the ADNc fragment with the ADNc of barley 6-SFT, other mono and dicotyledon fructan genes and acid invertases of plants.

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Registro:
Título : Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas    
Autor : Puebla, Andrea Fabiana
Director : Pontis, Horacio G.
Año : 1999
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Fundación para Investigaciones Biológicas Aplicadas (FIBA). Centro de Investigaciones Biológicas (CIB)
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3102_Puebla
Idioma : Español
Area Temática : Biología / Fisiología Vegetal
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