Tesis > Documento


Ver el documento (formato PDF)   Balañá, María Eugenia.  "Receptores con actividad de tirosina-quinasa tipo I (erbB-2, erbB-3 y erbB-4) y su ligando, heregulina, en modelos experimentales de carcinogénesis mamaria"  (1998)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
URL:
     
Resumen:
La alta incidencia de cáncer de mama ha creado la necesidad de comprender el funcionamiento de las vias regulatorias de la glándula mamaria. Las alteraciones en la expresión y vias de señalización de los factores de crecimiento parecen críticas en el desarrollo y progresión de las neoplasias de mama. El conocimiento de los circuitos regulatorios del crecimiento celular en la glándula mamaria es de suma importancia para la prevención, diagnóstico y tratamiento del cáncer de mama. Con este objetivo, se ha prestado significativa atención a los miembros de la familia de ligandos de los erbBs y sus receptores con actividad de tirosina-quinasa en células mamarias tanto normales como transformadas. En el presente estudio se demostró la existencia de interacciones entre las vías de señalización de los progestágenos y las vias de la heregulina (HRG) y los erBs en tumores mamarios. Se utilizó un modelo de carcinogénesis hormonal, en el cual el progestágeno sintético acetato de medroxiprogesterona (MPA) indujo la aparición de adenocarcinomas mamarios en hembras vírgenes de la cepa Balb/c. Los estudios de los receptores con actividad de tirosina quinasa tipo I (erbB-2, erbB-3 y erbB-4 ) y de su ligando, HRG, fueron realizados utilizando tres tipos de tumores del modelo de carcinogenesis inducida por MPA: tumores ductales progestágeno- dependientes (HD) con altos niveles de receptores para estrógenos (RE) y progesterona (RP), las variantes tumorales progestágeno - independientes (HI) de los anteriores, que si bien conservan los RE y RP proliferan de manera MPA- independiente y tumores hormono- independientes de origen lobulillar que carecen de RE y RP. Se encontró sobreexpresión de erbB-2 y erbB-3 y bajos niveles de expresión de erbB-4 en todos los tumores estudiados. En todos los tumores lobulillares y en uno de los ductales la sobreexpresión del erbB-4 se debió a amplificación génica. Los mismos patrones de expresión se mantuvieron en los cultivos primarios de células epiteliales provenientes de estos tumores. El MPA indujo una regulación positiva de la expresión de ARNm de HRG, erbB-2 y erbB-3 en las líneas tumorales HD. La progresión hacia un fenotipo progestágeno independiente (HI) se acompañó de una mayor expresión constitutiva de HRG, erbB-2 y erbB-3. La expresión de HRG se detectó en las células tumorales epiteliales, indicando que la HRG actuaría a través de un mecanismo autocrino en cancer de mama. Al tratar células epiteliales malignas con oligodeoxinucleótidos antisentido (ASODN-1) al ARNm del erbB-2, se encontró una inhibición del crecimiento inducido por MPA en las líneas tumorales HD y del crecimiento autónomo de las líneas tumorales HI. Los mismos niveles de inhibición se obtuvieron usando ASODN-2 dirigidos a la secuencia consenso de tirosina- quinasa. El hecho de no haber encontrado efectos sinérgicos al tratar con una combinación de ambos ASODNs y MPA, otorgaria al oncogen erbB-2 una participación crítica en la proliferación mediada por MPA y el crecimiento autónomo de células HI. La HRG indujo un potente efecto proliferativo en en cultivos primarios de células HD y potenció el efecto mitogénico del MPA. En las células HI, que exhibieron fosforilación constitutiva del receptor erbB-2 , el tratamiento con HRG no tuvo efecto alguno sobre la proliferación, aportando evidencias de que la sobreexpresión del erbB-2 y su activación constitutiva conferida a estas células una ventaja proliferativa. El bloqueo de la síntesis endógena de HRG con ASODNs al ARNm de HRG en células HD inhibió el crecimiento inducido por MPA. El tratamiento de estas células tanto con HRG como con MPA resultó en la fosforilación en tirosina del erbB-2 y el erbB-3. Estos resultados indican que la HRG actuaría como mediador del efecto proliferativo del MPA. Se encontraron los mismos resultados in vivo, en tumores proveniente de ratones tratados con MPA. Además, los efectos proliferativos tanto del MPA como de HRG, fueron abolidos cuando las células se trataron con ASODNs al ARNm del erbB-2, otorgando al erbB-2 una participación fundamental en el crecimiento inducido por HRG. Finalmente, el bloqueo de la expresión del receptor tipo l de IGF (IGF-R I) con ASODNs especificos resultó en la completa inhibición de los efectos proliferativos de HRG, demostrando que la presencia de un IGF-R I funcional es esencial para la actividad mitogénica de HRG. Estos resultados aportan la primera evidencia de interacciones entre las vias de transducción de progestágenosy de HRG/erbBs en cáncer de mama y la primera demostración de que los efectos proliferativos de HRG requieren de IGF- R I.

Abstract:
The high incidence of breast cancer has created a compelling need to understand the growth regulatory pathways that function in the mammary gland. Alterations of growth factor pathways appear to be important in the development of breast cancer. The knowledge of the regulatory circuits for cell growth in the mammary gland will help us in prevention, diagnosis and treatment of the disease. The members of the erbB family of ligands and the receptor tyrosine kinases have received significant attention because of their involvement in proliferation of normal and transformed mammary cells. The present study addressed links between progestin and heregulin (HRG)/erbBs signaling pathways in mammary tumors. An experimental model of hormonal carcinogenesis, in which the synthetic progestin medroxyprogesterone acetate (MPA) induced mammary adenocarcinomas in female Balb/c mice, was used. Three types of tumors from the MPA-induced model of mammary carcinogenesis were included in this study. The first type were ductal progestin-dependent (HD) tumor lines that require MPA administration for their in vivo growth and express high levels of ER and PR content. The second were their progestin-independent (HI) variants, that are able to grow in absence of MPA administration. These HI tumors, in spite of an MPA independent pattern of growth, retain ER and PR expression. The third type of tumors analyzed were MPA-induced mammary carcinomas of lobular origin that lack ER and PR expression and evidence a HI behavior. Overexpression of erbB-2 and erbB-3 and low levels of erbB-4 expression were found in all tumors studied. In all HI-lobular tumors and in a HD-tumor the erbB-2 overexpression was due to a gene amplification. The same pattern of expression was maintained in primary cultures of epithelial cells from these tumors. MPA induced an in vivo up-regulation of HRG, erbB-2 and erbB-3 expression in HD tumor lines. Mammary tumor progression to a progestin-independent (HI) phenotype was accompanied by a high constitutive expression of HRG, erbB-2 and erbB-3. The HRG message arose from the tumor epithelial cell, indicating that HRG could play an autocrine role in mammary cancer. Incubation of malignant epithelial cells from HD tumors with antisense oligodeoxynucleotides to erbB-2 mRNA (ASODN-1) resulted in the complete inhibition of MPA-induced growth. Autonomous growth of HI cells was also inhibited by ASODN-1. The same level of inhibition was found using ASODN-2 to a tyrosine kinase consensus domain. The fact that we did not found synergistic effects of antisense oligonucleotides when we treated the cells with the combination of both ASODNs and MPA might confer to erbB-2 protein a pivotal role in tumor MPA-mediated proliferation. Primary cultures of malignant epithelial cells from a HD tumor line were used to investigate HRG involvement on cell proliferation. HRG induced a potent proliferative effect on these cells and potentiated MPA mitogenic effects. In HI cells, that exhibited a constitutive activation of erbB-2 receptor, treatment with HRG did not have effect on cell proliferation, providing evidence that erbB-2 overexpression and constitutive activation confers a proliferative advantage to these cells. Blocking endogenous HRG synthesis by ASODNs to HRG mRNA inhibited MPA-induced cell growth, indicating that HRG acts as a mediator of MPA-induced growth. Treatment of these cells with either MPA or HRG resulted in tyrosine phosphorylation of both erbB-2 and erbB-3. The same results were found in tumors growing in MPA-treated mice. Furthermore, both HRG and MPA proliferafive effects were abolished when cells were treated with ASODNs to erbB-2 mRNA, providing evidence for a critical role of erbB-2 in HRG-induced growth. Finally, blocking type I insulin-like growth factor receptor (IGF-IR) expression with ASODN resulted in the complete inhibition of HRG proliferative effect, demonstrating that a functional IGF-R I is required for HRG mitogenic activity. These results provide the first evidence of interactions between progestins and HRG/ErbB signal tranduction pathways in mammary cancer and the first demonstration that IGF-R I is required for HRG proliferative effects.

* A este resumen le pueden faltar caracteres especiales. Consulte la versión completa en el documento en formato PDF

Registro:
Título : Receptores con actividad de tirosina-quinasa tipo I (erbB-2, erbB-3 y erbB-4) y su ligando, heregulina, en modelos experimentales de carcinogénesis mamaria    
Autor : Balañá, María Eugenia
Director : Elizalde, Patricia
Año : 1998
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Instituto de Biología y Medicina Experimental (IByME)
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Químicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3115_Balana
Idioma : Español
Area Temática : 
Palabras claves : CANCER DE MAMA; RECEPTORES ERBBS; HEREGULINA; RECEPTOR TIPO I DE IGF; PROGESTAGENOS; BREAST CANCER; ERBBS RECEPTORS; HEREGULIN; IGF TYPE I RECEPTOR; PROGESTINS
URL al Documento : 
URL al Registro : 
hola chau _gs.DocumentHeader_ chau2 _documentheader_ chau3
Estadísticas:
     http://digital.bl.fcen.uba.ar
Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Universidad de Buenos Aires
Intendente Güiraldes 2160 - Ciudad Universitaria - Pabellón II - C1428EGA - Tel. (54 11) 4789-9293 int 34