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Ver el documento (formato PDF)   De Matos, Daniel Gustavo.  "Producción de embriones de bovinos in vitro : Estimulación de la síntesis de glutation durante la maduración in vitro de ocitos y su efecto sobre el desarrollo de los embriones"  (1999)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
Durante la maduración in vivo de oocitos existe una activa síntesis de glutation (GSH) y cumple un rol importante en la fecundación y en el desarrollo embrionario, mediante su mecanismo de oxidación y reducción. En los sistemas de producción de embriones in vitro (PIV) la síntesis de GSH se encuentra disminuida. Por ello, el objetivo de la presente tesis fue estimular su síntesis durante la maduración in vitro (MIV) de oocitos bovinos y evaluar su efecto en el desarrollo de los embriones. Para esto se puso a punto la técnica de PIV. Los resultados demostraron que: l) Durante la MIV de bovinos existe síntesis de GSH. 2) Dicha síntesis se puede incrementar con el agregado de cisteamina, β-mercaptoetanol, cistina o cisteína al medio de MIV. 3) Esto generó incrementos del orden del 70% al 100 % en los porcentajes de desarrollo hasta blastocistos. 4) Se aumentó la velocidad de desarrollo encontrándose más blastocistos al dia 6; siendo estos los mejores embriones para congelar. 5) Los niveles intracelulares de GSH generados durante la MIV, se mantienen durante la fecundación y recién desaparecen luego de los primeros estadios de desarrollo. 6) El desarrollo de los embriones es altamente dependiente de los niveles intracelulares de GSH alcanzados durante la MIV. 7) La cisteamina y la cisteína demostraron ser capaces de estimular la síntesis de glutation aún en oocitos que carecen de células del cumulus. En conclusión, la estimulación de la síntesis de glutation durante la maduración in vitro de oocitos bovinos incrementó tanto la tasa como la velocidad de desarrollo, obteniéndose más blastocistos al día 6 de cultivo in vitro siendo estos los más aptos para el congelamiento. Más aún, la cisteína o la cisteamina estimularon la síntesis de GSH en oocitos sin cumulus y en ausencia de un co-cultivo de células del cumulus. Esto es útil ya que aumenta la eficiencia de la técnica de PIV cuando se tienen oocitos con muy pocas células del cumulus y se trabaja sin co-cultivo.

Abstract:
There is an active synthesis of glutathione (GSH) during in vivo maturation and plays an important rol during fertilisation and embryo development due to its redox cycle. However, this synthesis is impaired during in vitro embryo production (IVP). Due to this, the objective of the present thesis was to evaluate the effect of stimulating GSH synthesis during bovine in vitro maturation (IVM) on embryo development. To do this, first of all we made the setup of the IVP technique. The experimental results demonstrate that: l) Glutathione synthesis exists during IVM. 2) The addition of cysteamine, β-mercaptoethanol, cystine or cysteine to the IVM medium stimulates GSH synthesis. 3) An increase on embryo development (70-100%) was observed when GSH synthesis was stimulated during IVM. 4) Due to this stimulation, more embryos appeared at day 6 and these embryos were the best for cryopreservation. 5) The intracellular GSH levels obtained after stimulation its synthesis during IVM, continue after fertilisation and disappeared during the first stages of embryo development. 6) Embryo development depends on the intracellular oocyte GSH levels after IVM. 7) Moreover, cysteamine and cysteine can stimulate GSH synthesis in oocytes without cumulus cells. In conclusion, GSH synthesis stimulation during bovine oocyte IVM increases the rate of embryo development and more embryos developed faster and reached the blastocyst stage at day 6 of cultured being these the most suitable for freezing. Moreover, these results demonstrate that cysteine or cysteamine stimulate GSH synthesis in oocytes without cumulus mass and in the absence of a cumulus cell monolayer. This may be useful to increase the efficacy of IVM of those oocytes having few cumulus cell layers, in a system without co-culture.

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Registro:
Título : Producción de embriones de bovinos in vitro : Estimulación de la síntesis de glutation durante la maduración in vitro de ocitos y su efecto sobre el desarrollo de los embriones     =    In vitro bovine embryo production : Stimulation of Glutathione Synthesis during bovine oocyte in vitro maduration and it’s effects on embryo development
Autor : De Matos, Daniel Gustavo
Director : Guerrero, Graciela
Año : 1999
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Departamento de Biología. Laboratorio de Embriología Animal
Centro de Investigaciones Reproductivas Perez Companc
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3135_DeMatos
Idioma : Español
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