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Ver el documento (formato PDF)   Rawe, Vanesa Y..  "Eventos celulares durante la fecundación en humanos"  (2000)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
Para dilucidar distintos aspectos del proceso de fecundación y desarrollo temprano, en la presente tesis se analizaron oocitos humanos ‘no fecundados' y ‘fecundados anormalmente' luego de Fecundación In Vitro (FIV) e Inyección Intracitoplásmica de Espermatozoides (ICSI), haciendo hincapié en la arquitectura del citoesqueleto, estado de la cromatina, organización del áster y presencia de activaciones abortivas. Se estudiaron un total de 815 oocitos clasificados como ‘no fecundados’ y 153 oocitos clasificados como ‘fecundados anormalmente' luego FIV e ICSI. El material se procesó para inmunofluorescencia mediante la utilización de anticuerpos monoclonales para la detección de B tubulinas y a tubulinas acetiladas. El material genético se estudió con Hoechst 33258 y se analizó por microscopía óptica (UV). El análisis citogenético se realizó en 189 oocitos activados luego de FIV e ICSI según la técnica de Tarkowski (1966). Durante las fallas de fecundación, la principal causa luego de FIV, fue la ausencia de penetración espermática (59,2%), el 10,5% mostró una falla de activación oocitaria y el 15,2% presentó alteraciones en la nucleación o migración de pronúcleos. Luego de ICSI, la principal causa de falla de fecundación fue la alteración de la activación oocitaria (36,5%). Un 18,5% de los oocitos detuvieron su desarrollo en la primera placa metafásica. El estudio cromosómico, permitió identificar la presencia de activaciones abortivas; metafases III (MIII), núcleos reticulares (NR) y núcleos telofásicos (NT). En la fecundación anormal, el patrón más frecuentemente detectado luego de FIV fue la presencia de 3 ó 4 pronúcleos (PNs), (77,4%). Por el contrario, luego de ICSI resultó ser la presencia de 1PN (65,2%). Se observaron leves diferencias en el desarrollo de subnúcleos entre ambos grupos.

Abstract:
In order to dilucidate different aspects during fertilzation and early development, we analyzed “non-fertilized" and “abnormally fertilized" human oocytes after In Vitro Fertilization (IVF) and Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI). We focused on the cytoskeletal architecture, chromatin configuration, aster organization and the presence of abortive activations. We analyzed 815 “non-fertilized"and 153 “abnormally fertilized" oocytes after IVF and ICSI. The material was processed for immunofluorescence to detect B tubulins and a acetylated tubulins. DNA was studied using Hoescht. Chromosomal spreads were performed by Tarkowski's air-drying method in 189 IVFand ICSI oocytes. During fertilization failure, the main reason after IVF was no sperm penetration (59.2%). The remaining oocytes showed different abnormal patterns: oocyte activation failure (10.5%) and defects in pronuclei apposition (15.2%). On the other hand, fertilization failure after ICSI was mainly associated to incomplete oocyte activation (36.5%). An 18.5% of the studied oocytes stopped their development at the metaphase of the first mitosis of the pre-embryo. The Chromosomal spreads allowed identifying abortive activations, including metaphase III and others. Immunofluorescence analysis of abnormal fertilization showed that the most frequent abnormal fertilization pattern found after IVF was the presence of 3 or 4 PNs (77.4%). On the other hand, the presence of 1 PN (65.2%) was the main pattern found after ICSI. No differences between both groups were seen in terms of subnuclei development.

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Registro:
Título : Eventos celulares durante la fecundación en humanos     =    Cellular events during fertilization in humans
Autor : Rawe, Vanesa Y.
Director : Vitullo, Alfredo D.
Año : 2000
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Centro de Estudios en Ginecología y Reproducción (CEGyR)
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3291_Rawe
Idioma : Español
Area Temática : 
Palabras claves : FECUNDACION IN VITRO; FALLA DE FECUNDACION; FECUNDACION ANORMAL; INYECCION INTRACITOPLASMICA DE ESPERMATOZOIDES; INMUNOFLUORESCENCIA; IN VITRO FEERTILIZATION; INTRACYTOPLASMIC SPERM INJECTION; ABNORMAL FERTILIZATION; FERTILIZATION FAILURE; IMMUNOFLUORESCENCE
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