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Ver el documento (formato PDF)   Ferreyra, Laura Inés.  "Estudio de la variabilidad y la diferenciación genética por medio de técnicas de Isoenzimas y RAPD en poblaciones naturales de especies e híbridos del Género Prosopis (Leguminosae)"  (2000)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
Se estudió por medio de la electroforesis de isoenzímas y RAPDs la variabilidad, diferenciación y estructura genética en poblaciones naturales de P. alba, P. nigra, P. ruscifolia, P. flexuosa y P. vinalillo y poblaciones de híbridos interespecificos (P. alba x P. nigra y P. alba x P. flexuosa). Se estudió además la posible correlación entre variables ambientales con loci isoenzimáticos y de RAPDs y si la diferenciación genética entre poblaciones podría estar asociada con las distancias geográficas entre las mismas. Las técnicas de isoenzímas permitieron el análisis de 21 loci de los cuales 16 fueron polimórficos. No se encontraron loci diagnósticos de especies. Estas sólo se diferenciaron por sus fiecuencias alélicas. La técnica de RAPDs identificó 28 locí de los cuales 5 permitieron reconocer inequívocamente las especies. Los valores de variabilidad genética promedio observados para isoenzímas (P = 37.5 — 66.7%; H = 0.14- 0.332) y para RAPDs (P = 32.1- 46.4 % ; H = 0.123- 0.246) fueron similares entre sí y con respecto a los estimados en estudios previos con ambas metodologías en especies de Algarobia. Se observó un exceso de homocigotas (F IS >0) en todos los loci polimórficos estudiados. Esto podría deberse a la existencia de cruzamientos endogámicos dentro de las poblaciones como consecuencia de la limitada dispersión de las semillas y el polen y a la autogamia parcial estimada en estudios previos (hasta un 28 %). Los niveles de diferenciación genética obtenidos entre poblaciones a partir de los datos de isoenzímas y RAPDs fueron similares (F ST-0.36 y 0.4 respectivamente) e indicaron una diferenciación altamente significativa entre poblaciones de diferentes especies. En ambos casos el flujo génico estimado (Nm = 0.8 y 0.3) fue menor que l individuo por generación, mientras que el flujo génico entre poblaciones de igual especie fue mayor que uno. Tanto para datos de isoenzímas y RAPDs la mayor diversidad ocurre dentro de las poblaciones (54-69%), es intermedia entre especies (23-42%) y baja entre poblaciones (416%). Se observaron correlaciones significativas entre frecuencias alélicas isoenzimáticas y algunas variables geográfico-climáticas mientras que no se observaron correlaciones significativas entre las variables geográfico-climáticas y las bandas RAPDs. También se observaron diferencias en los resultados cuando se evaluó la correlación entre las matrices de distancias genéticas y geográficas a partir de los datos de isoenzímas (correlación significativa) y RAPDs (correlación no significativa). La asociación de las variables de algunos loci isoenzimáticos con variables geográficas y/o climáticas sugiere un efecto selectivo de los mismos. El intervalo de distancias genéticas entre poblaciones coespecíficas obtenidas a partir de los datos de isoenzímas (0.04 y 0.12) fue similar al obtenido a partir de los datos de RAPDs (0.02 a 0.10). Tanto las isoenzímas como los RAPDs muestran una alta afinidad entre las especies estudiadas de Algarobia, ya que estas comparten la mayoría de los loci con similares frecuencias alélicas. La diferenciación entre especies medida por las distancias de Nei fueron en promedio con ambas metodologías relativamente bajas (0.10-0.27). Estos valores son esperados para sub o semiespecies según Ayala (1974). Los fenogramas obtenidos con ambas metodologías fueron similares entre sí y mostraron a poblaciones coespecíficas agrupadas. Las poblaciones hibridas analizadas no fueron en ningún caso intermedias entre sus progenitores putativos.

Abstract:
Isoenzyme electrophoresis and RAPD techniques were applied to analyze the genetic variability, differentiation and structure of natural populations of P. alba, P. nigra, P. flexuosa, P. vinalillo, P. ruscifolia and interspecific hybrid populations (P. alba x P. nigra and P. alba x P. flexuosa). The present study also evaluated if genetic variables (isozyme and RAPD loci) are correlated with environmental variables and if the genetic distances between populations are associated with geographic distances. Isozyme technique allowed analyzing 21 loci, 16 of which were polymorphic. Diagnostic loci of species were not found. Species were differentiated only by allelic frequencies. RAPD technique identified 28 loci. Only 5 of them allowed unequivocal species recognition. Estimates of genetic variability obtained from isozyme (P =37.5 —66.7 % ; H = 0.14 — 0.32) and RAPD (P = 32.1- 46.4 % ; H =0.123 —0.246) were similar to each other, and to previous estimates obtained using both techniques in other Algarobia species. Significant homozygote excess (F IS > 0) was observed in all polymorphic loci studied. It might be caused by endogamic crosses within populations, due to limited pollen and seed dispersal, and/or partial selfing, which, according to previous works, may reach a rate of 28%. The genetic differentiation among populations obtained from RAPD and isozyme data were similar (F ST = 0.36 and 0.40 respectively) and indicated highly significant differentiation among populations of different species. In both cases estimated gene flow (Nm = 0.8 and 0.3) was lower than one individual per generation. In contrast, gene flow estimates among cospecific populations were higher than one. The highest proportion of variation occurred within population (54 —69 %), the among species variation was intermediate (23 —42 %) and the lower value was observed among conspecific populations (4 —16 %). Significant correlation between isoenzymatic allelic frequencies and geographical or climatic variables was observed. They suggest selective effects of these loci. By contrast, no significant associations were found by RAPD bands. Differences in results were also found when the correlation between geographic distances and genetic distances were evaluated for isozyme (significant correlation) and RAPD (no significant correlation) data. Genetic distance range among cospecific populations from isozyme data (0.04 - 0.121) were similar to that obtained from RAPD data (0.017 —0.10). Both isozyme and RAPDs showed high similarity among the studied species of Algarobia, since most alleles are shared by almost species. The diferentiation among species within this section measured through Nei distance was relative low with both techniques, with values ranging within the expected according to Ayala et al. (1974) for sub to semispecies. The phenogram obtained with both methodologies were consistent and showed clusters of cospecific populations. Hybrid populations were not intermediate between putative parents.

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Registro:
Título : Estudio de la variabilidad y la diferenciación genética por medio de técnicas de Isoenzimas y RAPD en poblaciones naturales de especies e híbridos del Género Prosopis (Leguminosae)     =    Study of genetic variability and diferentiation in natural populations of species and hybrids of Section Algarobia of genus Prosopis (Leguminosae) by isozyme and RAPDs techniques
Autor : Ferreyra, Laura Inés
Director : Saidman, Beatriz Ofelia
Año : 2000
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3314_Ferreyra
Idioma : Español
Area Temática : Biología / Genética de Poblaciones
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