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Ver el documento (formato PDF)   Raimondi, Ana Rosa.  "Relación epitelio-conectivo en la carcinogénesis experimental bucal: variaciones de ploidía epitelial en relación a la expresión del factor de crecimiento fibroblástico-básico y fibrosis"  (2003)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
El modelo de la bolsa de la mejilla del hámster muy aceptado y utilizado, reproduce la cancerización de la boca humana y una fibrosis subepitelial semejante a la fibrosis de la submucosa. En el se han analizado extensamente las características de los tumores que produce, pero se ha prestado menos atención al estudio de las etapas previas a la aparición de tumores. Las neoplasias que se observan en el modelo se dan en forma focal, precedidas por lesiones pre-malignas muitifocales, en una clara manifestación de la instalación de un campo cancerizado al igual que en la boca humana. Dado que el carcinoma de la mucosa bucal ha mantenido su incidencia y sus bajos índices de sobrevida durante los últimos 20 años parece importante disponer de un modelo experimental bien caracterizado para su estudio. Aproximadamente el 90% de los cánceres humanos son carcinomas, por lo cual resulta de interés que el abordaje del estudio de la biología de los carcinomas sea desde la perspectiva de la interacción epitelio-mesénquima. En base a estas observaciones, el objetivo de esta tesis doctoral fue el de estudiar los cambios que subyacen a la transformación maligna del epitelio, a través del análisis de ploidía y la desregulación de la interacción epitelio-conectivo, caracterizándola por medio del estudio de los cuadros fibrosos subyacentes al epitelio transformado. Tratando de aportar datos que pudieran ser trasladados a la biología de las lesiones pre-malignas humanas y a la búsqueda de marcadores de cancerización de campo. Para ello describimos las áreas NUMF(epitelios histológicamente normales pero cancerizados) que configuran los cuadros propios de la cancerización de campo. Como primer paso en el estudio de la interacción epitelio-conectivo evaluamos a través del análisis de ploidía las alteraciones epiteliales, cuantificamos las áreas NUMF, pre-neoplásicas y neoplásicas, encontrando que las zonas NUMF presentan un mayor contenido de ADN respecto de la mucosa normal a las 16 semanas de tratamiento. Para analizar las alteraciones en el tejido conectivo caracterizamos los cuadros desmoplásicos a través de la cuantificación de las áreas de fibrosis. Encontramos que la fibrohilalinosis aparece muy precozmente, antes que se evidencien cambios morfológicos en el epitelio transformado (a las 7 semanas de tratamiento, subyacente a las áreas NUMF) se presentan volúmenes de fibrosis aumentados significativamente respecto de la mucosa normal. Luego analizamos la expresión del FGF-2 durante el proceso, tratando de relacionado con los cuadros fibrosos. Encontramos que las variaciones en la expresión del FGF-2 en el tejido epitelial coinciden con la evolución de la fibrosis subepitelial en las etapas tempranas y que los carcinomas expresan en muy baja cantidad el factor o no lo expresan (se observó una regulación a través de la isoforma de 18 kd del factor). Encontramos expresión de los receptores 2 y 3 del FGF en el tejido epitelial y conectivo en las lesiones pre-malignas y expresión irregular de los mismos en los tumores. Finalmente analizamos si existía expresión de VEGF en el modelo. El VEGF presentó un cambio de su patrón de expresión en el epitelio en relación a los cuadros fibrosos durante las etapas pre-neoplásicas. También estudiamos si existia actividad proteolítica, encontrando un patrón de actividad correspondiente al de las MMP-2 y 9 en las etapas tempranas. El análisis conjunto de los resultados expuestos en esta tesis nos lleva a considerar que ni el b-FGF ni el VEGF tendrían un rol preponderante en el proceso angiogénico general de este modelo, ni en los tumores, pero el b-FGF tendrían un rol importante en la producción de fibrosis, de gran magnitud en las etapas tempranas. Tanto el factor como los cuadros desmoplásicos disminuyen desde las etapas intermedias en adelante, revelando su influencia en la disrupción temprana de la interacción epitelio-conectivo. Por lo tanto, la fibrosis junto a la ploidía de las áreas pre-neoplásicas son una manifestación temprana de la cancerización de campo.

Abstract:
The hamster cheek pouch carcinogenesis model is universally accepted and wider employed as a model of human oral cancer. It closely mimics human oral carcinogenesis and exhibits a subepithelial fibrosis that resembles the fibrosis of the submucosa. The tumors that develop as a result of the carcinogenesis protocols have been extensively studied. However, the earlier stages of malignant transformation have been less studied. Foci of neoplastic growth are preceded by multifocal premalignant lesions that evidence the presence of field cancerized tissue as occurs in the human oral cavity. Given that the incidence and low survival rate of oral carcinoma have remained unchanged over the last 20 years, a well characterized experimental model to study the different aspects of this pathology is of great value. Approximately 90% of all human cancers are carcinomas. Within this context it is interesting to address carcinoma biology from the viewpoint of epithelium-mesenchyma interactions. Based on these observations, the aim of the present PhD Thesis was to study the changes that underlie epithelial malignant transformation employing ploidy analysis and the evaluation of the deregulation of the interaction between epithelium and connective tissue. We characterized this interaction by evaluating the fibrosis that underlies the transformed epithelium. The particular aim was to contribute data that may be applied to the biology of human precancerous lesions and search for markers of field cancerization. Within this context we described NUMF areas (histologically normal but cancerized areas of epithelium), characteristic of field cancerization. As the first stage in our study of epithelium-connective tissue interactions we performed a ploidy analysis of the different areas of epithelium, i.e. NUMF, pre-neoplastic and neoplastic epithelia. We showed that the DNA content of NUMF epithelium at 16 weeks of treatment was larger than that of normal epithelium. We analyzed the changes in connective tissue in terms of desmoplastic features by quantitative evaluation of areas of fibrosis. We demonstrated that fibrohyalinosis appears very early on in the process of malignant transformation before the morphological changes become apparent in the transformed epithelium. At 7 weeks of treatment significantly larger volumes of fibrosis were detected underlying NUMF areas than those underlying normal tissue. We also analyzed the expression of FG-2 during the process and the association with fibrosis. We found that variations in the expression of FG-2 in epithelial tissue correlate with the evolution of subepithelial fibrosis in the early stages and that carcinomas express the factor very little or not at all (we observed regulation via the 18 kd isoform of the factor). We detected expression of receptors 2 and 3 of FG-2 in the epithelium and the connective tissue in precancerous lesions and irregular expression in tumors. We also examined the expression of VEGF in the model. VEGF evidenced a change in its expression pattern in the epithelium above areas of fibrosis that appear during the preneoplastic stages. The analysis of proteolytic activity revealed patterns of activity corresponding to MMP-2 and 9 in the early stages. A comprehensive analysis of the data presented in the present Thesis suggests that bFGF and VEGF do not play a central role in angiogenesis in this model or in tumors. bFGF would have an important role in the induction of fibrosis, a process which is particularly important in the early stages. Both the factor and the desmoplastic features decrease from the intermediate stages onwards, revealing their influence on the early disruption of the interaction between epithelium and connective tissue. In this way, fibrosis and ploidy in preneoplastic areas would be an early manifestation of field cancerization.

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Registro:
Título : Relación epitelio-conectivo en la carcinogénesis experimental bucal: variaciones de ploidía epitelial en relación a la expresión del factor de crecimiento fibroblástico-básico y fibrosis    
Autor : Raimondi, Ana Rosa
Director : Itoiz, M. E.
Año : 2003
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Facultad de Odontología. Cátedra de Anatomía Patológica. Laboratorio de Histoquímica
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3636_Raimondi
Idioma : Español
Area Temática : Biología / Biomedicina
Biología / Histología
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