Tesis > Documento


Ver el documento (formato PDF)   Hochbaum, Daniel.  "Una nueva función para un factor intercambiador de GDP/GTP"  (2004)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
URL:
     
Resumen:
Factores intercambiadores de GDP/GTP (GEFs), y sus proteinas G asociadas son piezas fundamentales en la maquinaria que transduce información desde el medio extracelular hacia respuestas específicas intracelulares. Entre ellas, la cascada de MAPKs, representa una via efectora ampliamente representada. De forma análoga a la activación de la vía ERK-1/2 dependiente de Ras, miembros de la familia Rho de proteínas G son capaces de activar la cascada de JNK, al ser cargado GTP, por sus correspondientes GEFs. En la búsqueda de nuevos reguladores de la actividad de JNK, hemos identificado a EPAC como un fuerte activador de JNK-1, EPAC (Exchange Protein Activated by CAMP) es un miembro de la creciente familia de GEFs que intercambian nucleótidos sobre la subfamilia Rap de proteinas G de Ia familia Ras. En la presente tesis, reportamos que mientras EPAC activa a JNK varias veces, una mutante constitutivamente activa de Rap1b (G12V), no es capaz, sugiriendo que Rap-GTP no es suficiente para transducir señales dependientes de EPAC hacia la activación de JNK. Es más, la señalización de EPAC a JNK no es bloqueada por la inactivación de Rap endógena, sugiriendo que la activación de Rap no es necesaria para esta respuesta. Consistentemente con estas observaciones, la utilización de mutantes que tienen delecionados dominios proteicos, muestran que el dominio catalitico GEF no es necesario para la activación de JNK mediada por EPAC. Estos estudios identificaron una región que se superpone con el dominio REM de EPAC, como crítico para la activación de JNK. De hecho, el dominio REM aislado es suficiente para activar JNK. Mediante a utilización de mutantes dominantes negativas de la cascada de JNK, hemos identificado a la familia Rho de pequeñas proteínas G como blanco de EPAC, en la activación de JNK. Incluso, una actividad intercambiadora de nucleótido para Rac y Cdc42, se encuentra presente en inmunoprecipitados de EPAC, sugiriendo la formación de un complejo entre EPAC y un putativo GEF para estas proteinas G. Concluimos que EPAC señaliza a la cascada de JNK a través de un nuevo mecanismo que no involucra su canónica acción catalitica, ej: intercambio de GDP/GTP sobre proteínas Rap. Esto representa no solo una nueva vía de activación de JNK, sino un mecanismo aún no descripto de señalización río abajo de EPAC.

Abstract:
Guanine Nucleotide Exchange Factors (GEFs) and their associated GTP binding proteins (G-proteins) are key regulatory elements in the signal transduction machinery that relays information from the extracellular environment into specific intracellular responses. Among them, the MAPK cascades represent ubiquitous downstream effector pathways. We have previously described that, analogous to the Ras-dependent activation of the Erk-1/2 pathway, members of the Rho family of small G-proteins activate the JNK cascade when GTP is loaded by their corresponding GEFs. Searching for novel regulators of JNK activity we have identified EPAC as a strong activator of JNK-1. EPAC (Exchange Protein Activated by CAMP)is a member of a growing family of GEFs that specifically display exchange activity on the Rap subfamily, of Ras small G-proteins. We report here that while EPAC activates the JNK several fold, a constitutively active (G12V) mutant of Rap1b does not, suggesting that Rap-GTP is not sufficient to transduce EPAC-dependent JNK activation. Moreover, EPAC signaling to the JNKs was not blocked by inactivation of endogenous Rap suggesting that Rap activation is not necessary for this response. Consistent with these observations, domain deletion mutant analysis shows that the catalytic GEF domain is dispensable for EPAC-mediated activation of JNK. These studies identified a region overlapping the REM domain as critical for JNK activation. Consistent with this, an isolated REM domain from EPAC is sufficient to activate JNK. Using dominant negative mutants of the JNK cascade, we identified the Rho family of small G proteins as a target for Epac mediated JNK activation. Indeed, an exchange activity towards Rac and Cdc42, is present in Epac immunoprecipitates, suggesting the formation of a complex between Epac and a putative GEF for these G proteins. We conclude that EPAC signals to the JNK cascade through a new mechanism that does not involve its canonical catalytic action, i.e. Rapspecific GDP/GTP exchange. This represents not only a novel way to activate the JNKs but also a yet undescribed mechanism of downstream signaling by EPAC.

* A este resumen le pueden faltar caracteres especiales. Consulte la versión completa en el documento en formato PDF

Registro:
Título : Una nueva función para un factor intercambiador de GDP/GTP     =    A novel function for a Guanosine nucleotide exchange factor
Autor : Hochbaum, Daniel
Director : Coso, Omar Adrian
Año : 2004
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Laboratorio de Fisiología y Biología Molecular
Grado obtenido : Doctor en Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_3732_Hochbaum
Idioma : Español
Area Temática : Biología / Biología Molecular y Celular
Palabras claves : GEF; MAPK; GTPASA; SEGUNDO MENSAJERO; FACTOR DE TRANSCRIPCION; GEF; MAPK; GTPASE; SECOND MESSENGER; TRANSCRIPTION FACTOR
URL al Documento : 
URL al Registro : 
hola chau _gs.DocumentHeader_ chau2 _documentheader_ chau3
Estadísticas:
     http://digital.bl.fcen.uba.ar
Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Universidad de Buenos Aires
Intendente Güiraldes 2160 - Ciudad Universitaria - Pabellón II - C1428EGA - Tel. (54 11) 4789-9293 int 34