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Ver el documento (formato PDF)   Ernesto, Juan Ignacio.  "Caracterización de distintos miembros de la familia de proteínas CAP en tracto reproductor masculino y femenino y su participación en el proceso de fertilización"  (2012-10)
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
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Resumen:
A pesar de la importancia del proceso de fertilización, es aún muy escasa la información disponible acerca de las moléculas involucradas. Las evidencias de nuestro laboratorio indican que las proteínas de la familia CRISP, miembro de la superfamilia CAP, serían claros mediadores del proceso de interacción de gametas. Teniendo en cuenta que las CRISP se expresan principalmente en el tracto reproductor masculino, el primer objetivo de esta Tesis ha sido investigar si las mismas también se expresan en el tracto reproductor femenino y cumplen un rol en el proceso de fertilización. Los resultados obtenidos utilizando los modelos de rata y ratón indicaron que mientras CRISP1 se encuentra presente en útero, oviducto, ovario, y células del cúmulus, CRISP2 se detecta sólo en ovario, y CRISP4 no se expresaría en el tracto de la hembra. Ensayos de fertilización in vitro utilizando espermatozoides y COC (complejos ovocito-cúmulus) provenientes de ratones knockout para CRISP1 indicaron que la proteína presente en el cúmulus cumpliría una función en el proceso de fertilización. Estudios posteriores revelaron que CRISP1 exhibe propiedades quimioatractantes hacia los espermatozoides, sugiriendo que éste podría ser el mecanismo por el cual CRISP1 del cúmulus participa en el proceso de fertilización. Dada la gran homología entre las CRISP y las GLIPR1, las cuales constituyen las dos familias mejor caracterizadas de la superfamila CAP, el segundo objetivo de este trabajo consistió en estudiar la presencia de proteínas GLIPR1 en el tracto reproductor masculino y su participación en la fertilización. Los resultados indicaron la expresión de GLIPR1L1 a nivel testicular y de GLIPR1L2 tanto en testículo como en epidídimo de ratón. La generación de ambas proteínas en forma recombinante y de sus correspondientes anticuerpos confirmó la presencia de las mismas en el espermatozoide y su participación específica en la primera etapa de unión a la zona pellucida. La información obtenida acerca del rol de las proteínas CRISP y GLIPR1 contribuirá a una mayor comprensión de los mecanismos moleculares involucrados en la interacción de gametas como así también al desarrollo de futuros métodos de regulación de la fertilidad tanto en animales como en el humano.

Abstract:
Despite the importance of the fertilization process, there is still little information about the molecules involved in it. Evidence from our laboratory indicates that proteins from de CRISP family, members of the CAP super family, would be clear mediators of the gamete interaction process. Considering that the CRISP are expressed primarily in the male reproductive tract, the first objective of this thesis was to investigate whether these proteins are expressed in the female reproductive tract and if they play a role in the fertilization process. The results indicated that while CRISP1 is present in uterus, oviduct, ovary and cumulus cells, CRISP2 is detected only in the ovary and CRISP4 is not expressed is the female reproductive tract. In vitro fertilization assays using both sperm and COC (oocyte-cummulus complex) from CRISP1 knockout mice indicated that the protein present in the cumulus fulfill a role in the fertilization process. Further studies revealed that CRISP1 exhibit sperm chemoattractant properties, suggesting that this might be the mechanism by which CRISP1 present in the cumulus participates in the fertilization process. Given the high homology between CRISP and GLIPR1, which are the two best characterized families from the CAP super family, the second objective of the present work was to study the presence of GLIPR1 proteins in the male reproductive tract and their participation in the fertilization process. Our results indicated that GLIPR1L1 is expressed in the testis while GLIPR1L2 is present in the testis and the epididymis. The generation of both recombinant proteins and their corresponding antibodies confirmed the presence of these proteins in the sperm (human and mouse) and their specific involvement in the first stage of binding to the zona pellucida. The information obtained about the role CRISP and GLIPR1 proteins will contribute to a greater understanding of the molecular mechanisms involved in gamete interaction as well as to the development of future methods to regulate fertility both in animals and humans.

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Registro:
Título : Caracterización de distintos miembros de la familia de proteínas CAP en tracto reproductor masculino y femenino y su participación en el proceso de fertilización     =    Characterization of different members of the CAP protein family in male and female reproductive tract and their participation in the fertilization process
Autor : Ernesto, Juan Ignacio
Director : Cuasnicu, Patricia S.
Consejero : Muschietti, Jorge
Jurados : Lustig, Livia  ; Tesone, Marta  ; Franchi, Ana
Año : 2012-10
Editor : Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Filiación : Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Instituto de Biología y Medicina Experimental (IBYME)
Grado obtenido : Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Ciencias Biológicas
Ubicación : Preservación - http://digital.bl.fcen.uba.ar/gsdl-282/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=tesis&d=Tesis_5223_Ernesto
Idioma : Español
Area Temática : Biología / Reproducción
Biología / Biología Molecular y Celular
Palabras claves : ESPERMATOZOIDE; CUMULUS; OVOCITO; FERTILIZACION; QUIMIOTAXIS; CRISP; GLIPR1; CAP; SPERM; CUMULUS; OOCYTE; FERTILIZATION; CHEMOTAXIS; CRISP; GLIPR1; CAP
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