Registro:
Documento: | Tesis Doctoral |
Disciplina: | biologia |
Título: | Caracterización funcional y molecular de la regulación del transporte de agua y del pH intracelular en células del túbulo colector cortical |
Autor: | Rivarola, Valeria |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Filiación: | Facultad de Medicina. Departamento de Fisiología y Biofísica. Laboratorio de Biomembranas
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Publicación en la Web: | 2017-03-01 |
Fecha de defensa: | 2002 |
Fecha en portada: | 2002 |
Grado Obtenido: | Doctorado |
Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Biológicas |
Director: | Capurro, Claudia; Parisi, Mario |
Idioma: | Español |
Tema: | biología/biología molecular y celular biología/fisiología animal
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Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3537_Rivarola |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3537_Rivarola.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3537_Rivarola |
Ubicación: | Dep.BIO 003537 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Rivarola, Valeria. (2002). Caracterización funcional y molecular de la regulación del transporte de agua y del pH intracelular en células del túbulo colector cortical. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3537_Rivarola |
Resumen:
Los túbulos colectores corticales (CCD) del riñón de mamífero juegan un papelcentral en la regulación del transporte de agua-solutos y en el equilibrio ácido-base delorganismo. Si bien muchos estudios han sido realizados para tratar de entender losmecanismos implicados en estos procesos, los mismos no han sido completamenteaclarados. En la presente tesis hemos utilizado a la línea celular RCCD1 (modelo de CCD) para intentar clarificar los mecanismos por los cuales se produce el movimientode agua y la regulación del pHi en este segmento del nefrón. En lo referente al movimiento de agua observamos que la línea celular desarrollaimportantes flujos en ausencia de fuerzas impulsoras osmóticas e hidrostáticas. Demostramos, además, que los mismos ocurrirían por un mecanismo de cotransporteagua-soluto ya que la línea no expresa acuaporinas. Basalmente predominaría un flujosecretor asociado al movimiento de Cl-, HCO3- y K+. La hormona AVP estimularía, a “corto plazo”, una absorción de fluido acoplada a la de Na+ y, a “largo plazo”, un flujosecretor acoplado al Cl- probablemente mediado por el canal CFTR. En cuanto a la regulación del pHi demostramos funcional y molecularmente que lalinea expresa, basolateralmente, las isoformas NHE-1 y NHE-2 del intercambiadores Na+/H+. La NHE-1 sería la encargada de la regulación del pHi ante una carga ácida y la NHE-2 mantendría el pHi basal. En lo que respecta a los intercambiadores Cl-/HCO3-demostramos que la línea celular RCCD1 expresa las isoforrnas AE2, AE3 y AE4. Lasdos primeras se localizarían en la membrana basolateral y la AE4 estaría en lamembrana apical. Funcionalmente AE3 y AE4 se encargarían de mantener el pHi basalmientras que la AE2 se activaría ante cargas alcalinas. Además proponemos que lascélulas RCCD1 tendrían plasticidad en la expresión de sus intercambiadores Cl-/HCO3-. Finalmente mostramos que la AVP es capaz de modular tanto a los intercambiadores Na+/H+ como a los Cl-/HCO3-. Interesantemente hallamos que esta hormona,tradicionalmente asociada a las células principales, podría también regular a lostransportadores Cl-/HCO3- presentes en las células intercalares.
Abstract:
The mammalian cortical collecting duct (CCD) plays an important role in theregulation of water-ion coupling and acid-base balance. Although several studies havebeen performed in order to study the bases of these processes, these have not beencompletely clarified. During this thesis we used the RCCD1 cell line (as a CCD model)to elucidate the mechanisms of water movement and pHi regulation in this part of thenefron. Conceming water movement this cell line developed important water fluxes in theabsence of osmotic or hydrostatic driving forces. As this cell line does not expressaquaporins, the mechanism involved in these movements is associated to a water-solutecotransport. In basal conditions RCCD1 cells developed a secretory flux associated to Cl-, HCO3- and K+ movements. A “short term” effect of AVP resulted in an absortiveflux associated to Na+ and, a “long term” effect in a secretory flux associated to Cl-probably driven by CFTR channel. Conceming pHi regulation our functional and molecular studies showed that RCCD1 cells express, in the basolateral membrane, the NHE-l and NHE-2 isoforms ofthe Na+/H+ exchanger. NHE-1 would be responsible of pHi recovery after an acid loadand NHE-2 would mainly be involved in steady-state pHi. On the other hand RCCD1cells express AE2, AE3 and AE4 isoforms of the Cl-/HCO3- exchanger. AE2 and AE3would be localized in the basolateral membrane and AE4 in the apical one. AE3 and AE4 would be involved in Steady-state pHi while AE2 would be activated after analkaline load. Moreover we demonstrated that RCCD1 cells would have plasticity in Cl- /HCO3- exchanger expression. Finally our studies showed that AVP can activated both NHE and AE exchangers. Interestingly, we propose that the hormone action,traditionally associated to the principal cells, would be also able to regulate Cl-/HCO3-exchanger in the intercalated cells.
Citación:
---------- APA ----------
Rivarola, Valeria. (2002). Caracterización funcional y molecular de la regulación del transporte de agua y del pH intracelular en células del túbulo colector cortical. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3537_Rivarola
---------- CHICAGO ----------
Rivarola, Valeria. "Caracterización funcional y molecular de la regulación del transporte de agua y del pH intracelular en células del túbulo colector cortical". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2002.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3537_Rivarola
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