Estudio de la composición genómica de forrajeras mediante técnicas electroforéticas y de citogenética clásica y molecular

Ferrari, María Rosa

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	biologia
Título:	Estudio de la composición genómica de forrajeras mediante técnicas electroforéticas y de citogenética clásica y molecular
Autor:	Ferrari, María Rosa
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Filiación:	Departamento de Ecología, Genética y Evolución
Publicación en la Web:	2019-03-29
Fecha de defensa:	2004
Fecha en portada:	2004
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor en Ciencias Biológicas
Director:	Poggio, Lidia
Director Asistente:	Grezerstein, Eduardo
Idioma:	Español
Tema:	biología/biología molecular y celular biología/agrobiotecnología
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3716_Ferrari
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3716_Ferrari.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3716_Ferrari
Ubicación:	Dep.BIO 003716
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Ferrari, María Rosa. (2004). Estudio de la composición genómica de forrajeras mediante técnicas electroforéticas y de citogenética clásica y molecular. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3716_Ferrari

Resumen:

Tricepiro es un cereal sintético de alto valor forrajero, que fue obtenido por el Ing. Covas en 1972. Lo logró cruzando triticale Don Santiago INTA(2n=42) portrigopiro Don Noé INTA(2n=56). Luego de varios años de mejoramiento logróla linea 3-40 que fue inscripta en 1994 como cultivar con el nombre de tricepiro Don René INTA.Esta línea, que presenta resistencia a enfermedades y estolerante al frío y a la salinidad del suelo, constituye un material apto para serusado en programas de mejoramiento. Dentro de los objetivos de la presente tesis estuvieron. Establecer y comparar los patrones electroforéticos de gluteninas de alto pesomolecular (HMW)de tricepiro Don René INTA y de sus progenitores, así comodeterminar la existencia de variabilidad para dichas proteínas en lineashermanas del cultivaren estudio. Determinar la estabilidad meiótica de tricepiro Don René INTA mediante elestudio de la meiosis masculina. Establecer la relación entre la rugosidad de las semillas y el contenido deheterocromatina telomérica de los cromosomas de centeno, en lineas detricepiro Determinar la composición genómica de tricepiro Don René INTA eindividualizar sus cromosomas mediante técnicas de citogenética clásica ymolecular. La electroforesis de proteinas seminales (SDS-PAGE) mostró que tricepiro Don René INTA tiene cinco bandas correspondientes a gluteninas (HMW), ningunade las cuales le es propia. De las cinco bandas, cuatro las comparte con ambosprogenitores y la quinta la comparte sólo con trigopiro Don Noé INTA. Estabanda podría provenir de Thinopyrum. Las 9 lineas hermanas de tricepiro Don René INTA que se estudiaron tienen las cinco bandas que presenta el cultivar. Dos de estas líneas, tienen una banda adicional, FA-L2 la comparte contrigopiro Don Noé INTA y FA-L66 tiene una banda propia. Los estudios meióticos de tricepiro Don René INTA mostraron la formación de 21 II en diacinesis. Sin embargo, en Metafase I se observaron asincronías en el comportamiento cromosómico tales como bivalentes que segregabantempranamente y presencia de univalentes fuera de la placa ecuatorial. Elcomportamiento meiótico no reveló la presencia de heterocigosis paraalteraciones numéricas ni estructurales. El número de micronúcleos presentesen las tetradas osciló entre 0 y 9 y se calculó un Índice Meiótico de 66,47. Se hizo bandeo C y DAPI en cromosomas mitóticos de tricepiro Don René INTA. Se observaron 14 cromosomas con importantes bandas teloméricasatribuibles a cromosomas de centeno y 14 cromosomas con numerosasbandas intersticiales, supuestamente pertenecientes al genoma B de trigo, deacuerdo con patrones usados internacionalmente. Tricepiro Don René INTA posee semillas rugosas, mientras que la línea FA-L2tiene semillas lisas. Se determinó que el tamaño de las bandas teloméricas delgenoma R es similar en ambas lineas. Por lo tanto, las caracteristicasrugosidad de las semillas y tamaño de las bandas teloméricas de loscromosomas de centeno no muestran asociación . Los estudios de hibridación in situ con ADN genómico total de Secale cereale y Thinopyrum bessarabicum como sondas y Triticum aestivun var Chinese Springcomo bloqueante (GISH) mostraron que Tricepiro Don René INTA tiene 14cromosomas de centeno y 28 de trigo. En un par de estos últimos se detectóintrogresión de Thinopyrum. La identificación de todos los cromosomas delhibrido se logró haciendo hibridación con las sondas pSc 119.2 y pAs1 (FISH). La composición genómica y la constitución cromosómica de tricepiro Don René INTA es la siguiente: 7 pares de cromosomas de centeno (1R, 2R, 3R, 4R, 5R, 6R, 7R); 7 pares de cromosomas del genoma A de trigo (1A, 2A, 3A, 4A, 5A, 6A, 7A); 7 pares de cromosomas del genoma B de trigo (1B, 2B, 3B, 4B, 5B, 6B, 7B). Introgresión del genoma J de Thinopyrum (posiblemente Th. ponticum 2n=70) en un par cromosómico del genoma A, que por su morfología y sutamaño podría ser el 6A.

Abstract:

Tricepiro is a synthetic cereal of high forage value obtained by G. Covas in 1972 in Argentina by crossing hexaploid triticale (2n=6x=42) and octoploidtrigopiro (2n=8x=56). Several years of self pollination resulted in a line, 3-40,that was registered as a cultivar under the name tricepiro Don René INTA. Thisline possesses high potential as a parent in breeding programmes due to itsmarked disease resistance and freezing and drought tolerance. Inside the objectives of the present thesis they were: to find homologiesbetween tricepiro Don René INTA and its ancestors through high molecularweight glutenines (HMW) analysis and to compare the variability betweenadvanced lines; to study the meiotic behavior in order to determine the meioticstability of tricepiro Don René INTA; to correlate kernel shrivelling in tricepirowith the size of terminal heterochromatin blocks on the rye chromosomes; tocharacterize the genome constitution of tricepiro Don René lNTA and identify itschromosomes using clasical and molecular cytogenetical techniques. Glutenines were fractionated by sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gelelectrophoresis ( SDS- PAGE) and bands of Triticum aestivum var. Chinese Springwere used for comparison. Tricepiro has five bands, four of them shared with bothprogenitors and one only with trigopiro Don Noé INTA. With the exception of twolines (FA L2 and FA L66) the advanced lines of tricepiro show very low variabilityamong them. Meiotic studies showed the presence of 21 II in diacinesis but in metaphase I anasincronic chromosome behavior was observed: some bivalents segregated earlyand univalents were detected. Tetrades have between 0 and 9 micronuclei and the Meiotic Index was 66.47. No heterocigosis for structural rearrayement or numericalalterations were detected. C-bands and DAPI showed 14 chromosomes with large terminal heterochromaticband that are putative rye chromosomes and 14 chromosomes with intersticialbands that are putative 14 wheat chromosomes (genome B). Tricepiro Don René INTA (shrivelling kernel) and FA-L2 (smooth kernel) didn't show statisticaldifferences between the size of their rye telomeric heterocromatin bands. So norelation were detected between shrivelling kernel and rye telomericheterocromatin bands in these tricepiro lines. The in situ hybridization using total DNA of Seca/e, Triticumand Thinopyrum asa probe (GISH) labelled with biotin and/or digoxigenin showed that tricepiro Don René INTA consists of 14 rye chromosomes and 28 wheat chromosomes. Small introgression zones of Thinopyrum in wheat chromosomes weredetected. FISH using the repetitive DNA probes pSc 119.2 and pAs1 labelledwith biotin, leads us to state that the genomic composition and thechromosomes identification of tricepiro Don René INTA are the folowing: 7 rye chromosomes pairs (1R, 2R, 3R, 4R, 5R, 6R, 7R). 7 wheat chromosomes pairs belonging to the B genome (1B, 2B, 3B, 4B, 5B, 6B, 7B). 7 wheat chromosomes pairs belonging to the A genome (1A, 2A, 3A, 4A, 5A, 6A, 7A). Introgression of a region from Thinopyrum in a wheat chromosome pairbelonging to the A genome (putative chromosome 6A).

Citación:

---------- APA ----------

Ferrari, María Rosa. (2004). Estudio de la composición genómica de forrajeras mediante técnicas electroforéticas y de citogenética clásica y molecular. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3716_Ferrari

---------- CHICAGO ----------

Ferrari, María Rosa. "Estudio de la composición genómica de forrajeras mediante técnicas electroforéticas y de citogenética clásica y molecular". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2004.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3716_Ferrari

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