Estudio de los mecanismos citotóxicos y de resistencia al Trastuzumab en esferoides de células tumorales HER2+

Rodríguez, Cristina Elisa

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	quimica
Título:	Estudio de los mecanismos citotóxicos y de resistencia al Trastuzumab en esferoides de células tumorales HER2+
Título alternativo:	Study of mechanisms of cytotoxicity and resistance of Trastuzumab in HER2+ tumor spheroids
Autor:	Rodríguez, Cristina Elisa
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Filiación:	Instituto de Oncología "Angel H. Roffo"
Publicación en la Web:	2022-04-05
Fecha de defensa:	2015-03-30
Fecha en portada:	2015
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Química Biológica
Director:	Fiszman, Gabriel León
Consejero:	Calvo, Juan Carlos
Jurado:	Kordon, Edith Claudia; Schillaci, Roxana; Alvarez, Elida M.
Idioma:	Español
Palabras clave:	CANCER DE MAMA; HER2; ESFEROIDES; TRASTUZUMAB; RESISTENCIA ANTITUMORALBREAST CANCER; HER2; SPHEROIDS; TRASTUZUMAB; ANTITUMORAL RESISTANCE
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5737_Rodriguez
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n5737_Rodriguez.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n5737_Rodriguez
Ubicación:	Dep.QUI 005737
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Rodríguez, Cristina Elisa. (2015). Estudio de los mecanismos citotóxicos y de resistencia al Trastuzumab en esferoides de células tumorales HER2+. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5737_Rodriguez

Resumen:

En este trabajo de tesis estudiamos los mecanismos de acción y resistencia al anticuerpo monoclonal Trastuzumab (Tz) anti HER2+, empleando un modelo de cultivo 3D que mimetiza tumores sólidos y avasculares. Generamos esferoides a partir de las células de adenocarcinoma mamario humano BT474 (HER2+) y evidenciamos la existencia de subpoblaciones celulares heterogéneas, con un gradiente de células proliferantes, quiescentes, hipóxicas, apoptóticas y autofágicas hacia su interior. Esta organización 3D moduló la respuesta al Tz, demostrando menor sensibilidad a su efecto antitumoral que las mismas células cultivadas como monocapas tradicionales. Para investigar la participación del sistema inmune, co-cultivamos esferoides con macrófagos y encontramos un mayor efecto antitumoral de Tz. Al analizar los mecanismos de acción de Tz, no detectamos inducción de apoptosis pero sí un arresto de las células en G0/G1. Tz disminuyó la población apoptótica descripta sólo en esferoides y fue capaz de inducir autofagia. Al inhibir la autofagia, logramos aumentar la sensibilidad al Tz y describimos una interacción clave entre apoptosis y autofagia. Confirmamos este resultado estableciendo una línea celular resistente al Tz que demostró ser más sensible a la inhibición de la autofagia que la línea parental BT474. En síntesis, este trabajo demuestra que en una organización en 3D existe una interacción entre los mecanismos de muerte y sobrevida celular en respuesta a Tz y que de su balance depende el desarrollo de resistencia. Esto podría ser la clave para reconocer nuevos blancos terapéuticos y superar la resistencia a Tz.

Abstract:

In this thesis, we study the mechanisms of action and resistance development in the treatment with the anti HER2 monoclonal antibody Trastuzumab (Tz), using a model of cell growth in 3D that mimics the structure of solid and avascular tumors. We cultured human mammary adenocarcinoma BT474 cells (HER2+) as spheroids and observed a gradient of proliferating, quiescent, hypoxic, apoptotic and autophagic cells towards the inner core. This 3D organization modulated response to Tz, being spheroids less sensitive to its antitumoral effect than traditional monolayers. In order to study the participation of the immune system, we co-cultured spheroids with macrophages and found that their presence increased the antitumoral effect of Tz. When we studied the mechanisms of action of Tz, we did not observe apoptosis induction but found cell arrest in G0/G1 phase. Tz reduced the apoptotic population only detected in spheroids and induced autophagy. We were able to increase sensitivity to Tz by autophagy inhibition and described a link between apoptosis and autophagy. We confirmed this result by developing a Tz resistant cell line that was more sensitive to autophagic inhibition than the parental BT474 cells. In summary, our experiments shows that in 3D cell organization, there is a link between death and survival mechanisms in the response to Tz and that resistance depends on their balance. This could be the key to find new therapeutic targets and overcome Tz resistance.

Citación:

---------- APA ----------

Rodríguez, Cristina Elisa. (2015). Estudio de los mecanismos citotóxicos y de resistencia al Trastuzumab en esferoides de células tumorales HER2+. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5737_Rodriguez

---------- CHICAGO ----------

Rodríguez, Cristina Elisa. "Estudio de los mecanismos citotóxicos y de resistencia al Trastuzumab en esferoides de células tumorales HER2+". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2015.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5737_Rodriguez

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